选取适龄的小鼠运用三溴乙醇腹腔打针进行麻醉，之后运用剃毛器剃除头部毛发，运用立体定位仪定位方针皮层。然后运用高速颅骨钻，钻出一个大约0.2mm2的小洞，随后运用微量打针控制台和微量打针泵将相关腺相关病毒打针到方针皮层的第五层，速度设置为40nL/min，打针完成后留针10-15min，以避免病毒走漏至其他区域。病毒打针完成后，涂改碘伏灭菌，然后将头皮缝合，放回到鼠笼，等候病毒表达及相关处理。

  因为需求做小鼠活体清醒时钙成像试验，所以该试验分为两步进行。在第一天预备阶段，首要选取试验小鼠腹腔打针三溴乙醇进行麻醉，运用剃毛器剃除头部毛发，之后运用手术剪去除头皮安排，并运用酒精棉球擦洗除掉颅骨外表结缔安排，向小鼠眼睛涂改卡波姆滴眼液。随后将两根固定棒以恰当的距离平行粘在小鼠颅骨上，进一步运用牙科水泥做加固。等候固定完成后，将小鼠放回鼠笼养殖。第二天进行试验阶段，在正式试验之前将小鼠提早固定习惯0.5-1h，然后运用高速颅骨钻在方针脑区制造一个圆形成像区域，当心去除颅骨，避免出血，保存硬脑膜，随后盖上盖玻片并运用胶水关闭缝隙。等候胶水凝结后，用ACSF当心清洗盖玻片表层，去除污渍后滴加超纯水后，就能够直接进行双光子成像。成像时在Time series形式下以2Hz的速度进行图画收集。所收集得到的图画运用ImageJ软件进行剖析。

  加快转棒试验被用来检测小鼠的运动学习才能。该试验运用Rotamex Rotarod体系，参数设置为：最小速度2rmp，最大速度为80rmp，加快度为5，单方向滚动。共分为三天进行，在每天正午进行三次丈量，每次开端之前运用酒精擦洗除掉滋味，并将小鼠放于2rmp转棒上习惯1min，然后开端计时直到小鼠坠落或许小鼠抱杠旋转3圈停止，最终计算每只小鼠三次时刻取平均值代表该小鼠当天运动才能。

  旷场试验被用于检测小鼠焦虑心情及自主运动才能。该试验运用50cm×50cm×50cm的通明旷场，旷场中心区域为（25cm×25cm），运用动物行为剖析软件来盯梢记载和剖析小鼠在旷场中10min的运动轨道及时刻。运用中心区域逗留时刻来衡量小鼠的焦虑水平，在旷场内总移动距离衡量小鼠自主运动才能。

  爬杆试验是用来检测小鼠的肢体和谐才能的试验之一。该试验是将一直径为2.5cm的乒乓小球固定于一根长为70cm、直径为1cm的竹竿顶端，并在竹竿上缠纱布避免打滑。将小鼠置于球顶，使其沿着笔直竹竿从上向下爬动，记载所运用时刻，共进行三次，每次距离5min。在真实开端之前一天，让小鼠学习2-3次。

  平衡木试验（横杆跑动试验）被用来检测小鼠平衡才能和运动才能。该试验在一暗淡安静房间进行，运用一宽3cm，长70cm的扁平木板，并在平衡木一端衔接一洁净小鼠的鼠笼，整个设备距离地上高100cm。将小鼠放到平衡木另一端，记载小鼠从平衡木一端穿越到鼠笼所用的时刻，共进行三次，每次距离5min。在正式试验开端之前，练习小鼠3-5次。

  埋珠试验被用于检测小鼠的焦虑水平及刻板行为。该试验在一安静环境下进行，将小鼠独自放入一个试验箱，铺满高5cm的垫料，并放入15颗大理石珠，共放3排，每排5颗，测验10min，然后人工计算埋葬体积50%的大理石珠数量，共进行三次。

  巴恩斯迷宫被用于评价小鼠的空间学习和回忆才能。该试验在安静漆黑环境下进行，运用一个直径为60cm，厚度为15mm的圆形乳白色亚克力板制造而成，在其边际1cm处均匀分布有12个直径为5cm的圆洞，一起配备有两个五面的敞开性黑色盒子，标准分别为20cm×8cm×8cm及10cm×10cm×10cm，一个为开端盒，一个为逃避盒，整个设备被放置于距离地上100cm高的可旋转的支柱上。运用动物行为剖析软件来盯梢记载和剖析小鼠的运动轨道及时刻。

  第一天正式试验开端前两个小时提早将小鼠安置于漆黑安静环境中，并顺次独自置于逃避盒内习惯2min。

  移开开端盒，开端追寻小鼠轨道。当小鼠身体彻底进入逃避盒，则计为成功逃避，并让小鼠在逃避盒内逗留30s，每次最多调查4min。若在此期间，小鼠未能够成功找到逃避盒，则将小鼠人为放入逃避盒内并逗留30s。每只动物开端前都要运用酒精对迷宫进行除味。

  之后第2-5天试验进程均同上，除掉独自放入逃避盒内习惯，且要确保都在同一时刻段内进行，而且每天练习时最好将迷宫随机滚动数个洞的方位，但要确保逃避盒一直固定在同一方位，以避免小鼠依托气味而非回忆来确认逃避盒的方位。

  试验参数：找到安全盒的潜伏期（时刻）和在此之前的过错次数（小鼠把头伸向或嗅探任何一个非方针洞记为一次）。

  新物体辨认试验是运用小鼠关于别致物体的探究行为而规划的检测学习回忆的办法。试验分为两天进行，第一天是学习阶段和短期回忆阶段，第二天是长时刻回忆阶段。在试验开端的前一天，将小鼠置于试验箱（50cm×50cm×50cm）中养殖以提早习惯试验盒子。在第一天学习阶段，在试验箱的左上角和右上角放置彻底相同的两个柱形阻隔笼，快速将小鼠面向两阻隔笼，放置于底部中心方位，然后发动追寻记载软件，使小鼠在箱内自在探究10min。之后将小鼠取出，独自置于一鼠笼，等候30min以进行短期回忆测验。在短期回忆阶段，在将试验箱右上角的物体换为以别致物体，然后依照学习阶段办法将小鼠放入箱内使其自在探究5min。距离24h后，进行第二天的长时刻回忆阶段，与第一天短期回忆阶段试验相同。试验运用动物行为剖析软件记载并剖析小鼠各个阶段的探究进程及对不同物体的探究时刻。留意：试验要确保在安静环境下进行，而且每一只小鼠进行试验前都要运用酒精对试验箱及物体进除味。

  高架十字迷宫试验是用于检测小鼠焦虑样心情的试验。该试验运用十字形迷宫，包括两个敞开臂，两个闭合臂，相间摆放，敞开臂为44cm×12cm，闭合胳膊为44cm×12cm×30cm，整个设备离地高100cm。测验之前，运用酒精擦洗除掉残留气味。测验时，将小鼠放入到中心区域，使头朝向敞开臂，并用动物行为剖析软件记载和剖析小鼠在10min的运动轨道及时刻。运用敞开臂的逗留时刻与总时刻的比值来衡量小鼠的焦虑水平。

  病毒介导的突触白过表达诱导运动缺点，但对运动、焦虑或空间回忆的影响很小

  在MPTP诱导的前期PD模型中，运动皮层的树突有着十分显着升高的转化率，而且其钙活动也增加了三倍以上。在打针AAV-SNCA和AAV-mCherry的一起，等比例混入了钙指示剂AAV-CaMKIIα-GCaMP6s到运动皮层的第五层，等病毒表达21天后进行钙成像。

  2、张博锐. 小鼠帕金森病模型中部分神经炎症关于皮层环路和运动学习功用的调控机制研讨[D].暨南大学,2022.

  往期试验办法，需求的教师可根据以下操作进行查阅：进入大众号脑声常谈→底部菜单栏脑声帮手办法检索→最上方查找框输入试验称号，您找的试验办法就出来啦！